超滤的主要应用
超滤是一种膜分离技术,它的特点是使用不对称多孔膜根据分子的大小来分离溶液中的大分于物质与小分子物质。超滤尤其适用于大分子溶液的浓缩、不同种类分子的纯化以及溶剂交换等。超滤法是一种温和甜、非变性的物理方法,比其它分离方法有效率更高、更灵活的优点。
浓缩
使用超滤来增加所需大分子溶质的浓度,即大分子被超滤膜截留而小分子和溶剂可自由通过,从而达到浓缩的目的。
梯度分离
按分子大小梯度分离样品中的溶质分子时,超滤是一种经济有效的方法,适用于分离分子量相差10倍以上的分子组分。在超滤过程中,虽然截留的大分子被浓缩,但滤过的溶质分子仍保持初始的浓度。
脱盐/纯化
脱盐即从大分子溶液中去除盐、非水性溶剂和小分子物质的过程。通过溶剂交换,可最有效地去除溶液中的小分子物质,并逐渐分离纯化出大分子物质。具体方法为:在溶液进行超滤的同时,不断向溶液中补充溶剂,补充溶剂的速度与溶液滤过速度相同,使体系始终保持恒定,这种方法又称透析超滤法。
超滤法的典型用途
●对蛋白质、酶、DNA、单克隆抗体、免疫球蛋白进行浓缩和脱盐
●药物、激素分析
●从PCR扩增仪的DNA中去除引物
●去除记的氨基酸和核苷酸
●HPLC样品制备
●样品的除蛋白
●从生物体液、发酵肉汤培养基中纯化抗生素、激素、药物
●从细胞悬液、裂解液中回收生物分子
●对蛋白质、酶、细胞、DNA、生物分子、抗体和免疫球蛋白进行常规意义的实验室浓缩和脱盐
●哺乳动物细胞的收集
●清洗细胞、纯化病毒、去除细胞碎片、除热原